আপনার প্রোটিন আপনার অ্যান্টিবডির আকারের সমান না হলে, আপনি 0.1M গ্লাইসিন, pH2-3 দিয়ে ইলুট করতে পারেন এবং তারপর SEC ব্যবহার করে অ্যান্টিবডি থেকে আগ্রহের প্রোটিন আলাদা করতে পারেন (সুপারডেক্স 200 এর মত)।
একটি প্রোটিন এলুটিং কি?
অ্যাসিটোনিট্রাইলের মতো জৈব দ্রাবকের ক্রমবর্ধমান পরিমাণের একটি গ্রেডিয়েন্ট দ্বারা প্রোটিনগুলি নির্গত হয়। প্রোটিন তাদের হাইড্রোফোবিসিটি অনুযায়ী নির্গত হয়। এইচপিএলসি দ্বারা বিশুদ্ধকরণের পর প্রোটিনটি এমন একটি দ্রবণে থাকে যা শুধুমাত্র উদ্বায়ী যৌগ ধারণ করে এবং সহজেই লাইওফাইলাইজ করা যায়।
কেন প্রোটিনের pH কম থাকে?
প্রোটিন A থেকে নির্গমনের জন্য কম pH বাফারের ব্যবহার পণ্য একত্রিতকরণে অবদান রাখার জন্য পরিচিত তবুও, প্রমাণের আরও সীমিত সেট পরামর্শ দেয় যে কম pH একমাত্র হতে পারে না প্রোটিন একত্রিত হওয়ার কারণ A ক্রোমাটোগ্রাফি, বরং, প্রক্রিয়াটির অন্যান্য দিকগুলি উল্লেখযোগ্যভাবে অবদান রাখতে পারে।
কিভাবে ইলুশন করা হয়?
বিশ্লেষনমূলক এবং জৈব রসায়নে, ইলিউশন হল দ্রাবক দিয়ে ধোয়ার মাধ্যমে একটি উপাদান থেকে আরেকটি উপাদান বের করার প্রক্রিয়া। ক্যাপচার করা আয়ন অপসারণের জন্য লোড করা আয়ন-এক্সচেঞ্জ রেজিন ধোয়ার মতো। … দ্রাবক অণুগুলি বিশ্লেষককে স্থানচ্যুত করার পরে, বিশ্লেষণটি বিশ্লেষণের জন্য কলাম থেকে বাহিত হতে পারে৷
কোআইপির জন্য আপনার কয়টি অ্যান্টিবডি দরকার?
রুটিন কো-আইপি পরীক্ষা-নিরীক্ষার জন্য, আমি যে অ্যান্টিবডি ব্যবহার করেছি তা হল 2ug এর বেশি নয় (আমার সেটে, 2500-5000ug ক্যাপচার করার জন্য 1.4 -2.0ug অ্যান্টিবডি যথেষ্ট প্রোটিন লাইসেট।) তবে এটি এখনও আপনার নমুনাগুলিতে আপনার লক্ষ্য প্রোটিনের অভিব্যক্তি স্তরের উপর নির্ভরশীল, তাই আপনাকে সম্ভবত কিছু পরিবর্তন করতে হবে।
